Alternative method using Real Time PCR for evaluation of inactivated Newcastle disease viral vaccine

The present work aims to establish a new alternative protocol to evaluate in vitro potency of inactivated Newcastle disease virus vaccine using Real Time PCR. Aqueous phases of seven inactivated Newcastle disease virus vaccines batches of different manufacturers were extracted by isopropyl myristate. The Newcastle disease virus antigen of each vaccine sample was determined by a standard Real Time PCR assay. Vaccines were inoculated into separate groups of 3-week-old specific pathogen free chickens using the recommended dose of vaccine. The immunogenicity was assessed for each vaccine by the Newcastle disease virus hemagglutination inhibition antibody titers. Individual serum samples were collected 4 weeks post vaccination, then vaccine efficacy and protection rates were recorded after challenge test of birds vaccinated with the virulent Newcastle disease virus. There is the possibility of using the Real Time PCR as an in vitro assay for vaccine evaluation. The Cycle Threshold values were ranged between 21.17 and 25.23. On the other hand, the hemagglutination inhibition titers ranged between 7.1 log2 to 6.2. The comparison between the Cycle Threshold values of the antigen extracts and the corresponding results of challenge test and in vivo hemagglutination inhibition assays using sera of vaccinated birds proved a strong correspondence between the in vitro and in vivo results(AU)

El presente trabajo pretende establecer un nuevo protocolo alternativo para la evaluación in vitro de la potencia de la vacuna de virus inactivado contra la enfermedad de Newcastle mediante PCR en tiempo real. Las fases acuosas de siete lotes de vacunas inactivadas contra el virus de la enfermedad de Newcastle de distintos fabricantes se extrajeron mediante miristato de isopropilo. El antígeno del virus de la enfermedad de Newcastle de cada muestra de vacuna se determinó mediante un ensayo estándar de PCR en tiempo real. Las vacunas se inocularon en grupos separados de pollos libres de patógenos específicos de 3 semanas de edad utilizando la dosis recomendada de vacuna. La inmunogenicidad se evaluó para cada vacuna mediante los títulos de anticuerpos de inhibición de la hemaglutinación del virus de la enfermedad de Newcastle. Se recogieron muestras individuales de suero 4 semanas después de la vacunación y, a continuación, se registraron la eficacia de la vacuna y los índices de protección tras la prueba de reto de las aves vacunadas con el virus virulento de la enfermedad de Newcastle. Existe la posibilidad de utilizar la PCR en tiempo real como ensayo in vitro para la evaluación de vacunas. Los valores del umbral de ciclo oscilaron entre 21,17 y 25,23. Por otra parte, los títulos de anticuerpos inhibidores de la hemaglutinación oscilaron entre 7,1 log2 y 6,2. La comparación entre los valores del umbral de ciclo de los extractos de antígeno con los resultados correspondientes de la prueba de reto y los ensayos de inhibición de la hemaglutinación in vivo, utilizando sueros de aves vacunadas, demostró una fuerte correspondencia entre los resultados in vitro e in vivo(AU)

Assessment of mycoplasma vaccine efficacy in reducing infection with Newcastle disease virus

The present work recorded the impact of using Mycoplasma gallisepticum vaccines on post-vaccinal response and protection against challenge with Newcastle disease virus. Specific pathogen-free chickens were divided into eight groups of forty chickens each. Group G1 was vaccinated with Mycoplasma gallisepticum live attenuated and Mycoplasma gallisepticum inactivated vaccines. Group G2 was vaccinated with Mycoplasma gallisepticum live attenuated, Mycoplasma gallisepticum inactivated and Newcastle disease inactivated vaccines. Group G3 was vaccinated with Mycoplasma gallisepticum live attenuated vaccine. Group G4 was vaccinated with Mycoplasma gallisepticum live attenuated and Newcastle disease inactivated vaccines. Group G5 was vaccinated with Mycoplasma gallisepticum inactivated vaccine. Group G6 was vaccinated with Mycoplasma gallisepticum inactivated and Newcastle disease inactivated vaccines. Group G7 was vaccinated with Newcastle disease inactivated vaccine. Group G8 was kept as non-vaccinated control. The Newcastle disease hemagglutination inhibition antibodies and mortality percentages were measured. Group G7 recorded the best protective Newcastle disease hemagglutination inhibition antibody titer (7 log2). Group G2 recorded a marginal satisfactory antibody titer (6 log2) after vaccination by the three tested vaccines. The remaining groups revealed unsatisfactory titers ranged from 0-5. The protection levels for G2, G4, G6 and G7 ranged from 70percent to 100percent, but only G2 and G7 were considered protected. G1, G3, G5 and G8 showed typical clinical signs of Newcastle disease. The Mycoplasma gallisepticum vaccines couldn't improve the response to Newcastle disease inactivated vaccine. The results suggest that Mycoplasma gallisepticum vaccination is immunosuppressive rather than immunomodulatory in Newcastle disease vaccination(AU)

En el presente trabajo se registró el impacto de la utilización de vacunas contra Mycoplasma gallisepticum sobre la respuesta posvacunal y la protección frente al reto con el virus de la enfermedad de Newcastle. Pollos libres de patógenos específicos se distribuyeron en ocho grupos de cuarenta pollos cada uno. El grupo G1 se vacunó con vacunas vivas atenuadas e inactivadas contra Mycoplasma gallisepticum. Al grupo G2 se le aplicaron las vacunas: viva atenuada contra Mycoplasma gallisepticum, inactivada contra Mycoplasma gallisepticum e inactivada contra la enfermedad de Newcastle. El grupo G3 se inmunizó con la vacuna viva atenuada contra Mycoplasma gallisepticum; el G4, con las vivas atenuadas contra Mycoplasma gallisepticum e inactivada contra la enfermedad de Newcastle; el G5, con la vacuna inactivada contra Mycoplasma gallisepticum; el G6 con las vacunas inactivadas contra Mycoplasma gallisepticum y la enfermedad de Newcastle; el G7, con la vacuna inactivada contra la enfermedad de Newcastle y el G8 se mantuvo como control no vacunado. Se midieron los anticuerpos de inhibición de la hemaglutinación contra el virus de la enfermedad de Newcastle y los porcentajes de mortalidad. El grupo G7 registró el mejor título de anticuerpos inhibidores de la hemaglutinación contra la enfermedad de Newcastle (7 log2). El grupo G2 registró un título de anticuerpos marginalmente satisfactorio (6 log2) tras la vacunación con las tres vacunas ensayadas. Los demás grupos revelaron títulos insatisfactorios que oscilaban entre 0 y 5. Los niveles de protección de los grupos G2, G4, G6 y G7 oscilaron entre el 70 por ciento y el 100 por ciento, pero sólo G2 y G7 se consideraron protegidos. Los grupos G1, G3, G5 y G8 mostraron signos clínicos típicos de la enfermedad de Newcastle. Las vacunas contra Mycoplasma gallisepticum no pudieron mejorar la respuesta a la vacuna inactivada contra la enfermedad de Newcastle. Los resultados revelan que la vacunación con Mycoplasma gallisepticum es más inmunosupresora que inmunomoduladora en la vacunación contra la enfermedad de Newcastle(AU)

Preparation and evaluation of formalized bivalent Newcastle and Salmonella poultry vaccine

This study was conducted to prepare and evaluate the potency of different inactivated vaccine formulations that protect chickens against Salmonella Enteritidis and Newcastle disease virus using Montanide as adjuvant. Protection and the humoral immune response of prepared vaccines against Salmonella Enteritidis and Newcastle disease virus was evaluated and compared to imported vaccine. In this study, different formulae of Salmonella Enteritidis and Newcastle disease vaccines were prepared and compared with the imported one by measuring the antibody titer against Newcastle disease virus by hemagglutination inhibition test and the antibody titer against Salmonella Enteritidis using Enzyme Linked Immunosorbent Assay. On the other hand, the protection percentages against Newcastle disease and Salmonella Enteritidis were recorded to determine the best effective formula. The highest hemagglutination inhibition antibody level against NDV at first week was recorded for the prepared combined Newcastle disease and Salmonella Enteritidis vaccine (4.2 log2) followed by the prepared monovalent Newcastle disease (3.4 log2); the lowest antibody level (3.1 log2) was obtained with the imported vaccine. A gradual increase was observed in all groups to 7.1 log2, 6.8 log2 and 6.4 log2 at fourth week post vaccination, respectively. The antibody titer against Salmonella Enteritidis was 552 for the prepared combined Salmonella Enteritidis and Newcastle disease, followed by the prepared monovalent Salmonella Enteritidis (477) at first week post vaccination; the antibody titer obtained for the imported vaccine was 477. There was a gradual increase to 1456, 1406 and 1130 at fourth week post vaccination, respectively. Prepared combined vaccines gave the highest protection percentage, followed by prepared monovalent types and finally imported vaccines. Vaccination by the prepared combined Salmonella Enteritidis and Newcastle disease vaccine may be a way to increase the resistance of birds to Salmonella and Newcastle and to decrease the shedding rate(AU)

Este estudio se llevó a cabo para preparar y evaluar la potencia de diferentes formulaciones de vacunas inactivadas que protegen a los pollos contra Salmonella Enteritidis y el virus de la enfermedad de Newcastle utilizando Montanide como adyuvante. Se evaluó la protección y la respuesta inmune humoral de las vacunas preparadas contra Salmonella Enteritidis y el virus de la enfermedad de Newcastle y se comparó con la vacuna importada. En este estudio se prepararon diferentes fórmulas de vacunas contra Salmonella Enteritidis y la enfermedad de Newcastle y se compararon con la importada midiendo el título de anticuerpos contra el virus de la enfermedad de Newcastle mediante la prueba de inhibición de la hemaglutinación y el título de anticuerpos contra Salmonella Enteritidis mediante ELISA. Por otra parte, se registraron los porcentajes de protección contra la enfermedad de Newcastle y Salmonella Enteritidis para determinar la fórmula más eficaz. El mayor nivel de anticuerpos inhibidores de la hemaglutinación contra el virus de la enfermedad de Newcastle, en la primera semana, se registró con la vacuna combinada preparada contra la enfermedad de Newcastle y Salmonella Enteritidis (4,2 log2), seguida de la vacuna monovalente preparada contra la enfermedad de Newcastle (3,4 log2); el menor nivel de anticuerpos (3,1 log2) se obtuvo con la vacuna importada. Se observó un aumento gradual en todos los grupos hasta alcanzar 7,1 log2, 6,8 log2 y 6,4 log2 en la cuarta semana tras la vacunación, respectivamente. El título de anticuerpos contra Salmonella Enteritidis fue de 552 para la vacuna combinada preparada contra la Salmonella Enteritidis y enfermedad de Newcastle, seguida por la vacuna monovalente preparada contra Salmonella Enteritidis (477) en la primera semana después de la vacunación; el título de anticuerpos obtenido con la vacuna importada fue de 477. Hubo un aumento gradual hasta 1456, 1406 y 1130 en la cuarta semana después de la vacunación, respectivamente. Las vacunas combinadas preparadas dieron el mayor porcentaje de protección, seguidas por los tipos monovalentes preparados y, por último, por las vacunas importadas. La vacunación con la vacuna combinada preparada contra la Salmonella Enteritidis y la enfermedad de Newcastle puede ser una forma de aumentar la resistencia de las aves a la Salmonella y Newcastle y de disminuir la tasa de excreción(AU)

The effect of Spirulina algae on the immune response of SPF chickens to commercial inactivated Newcastle vaccine in poultry / El efecto del alga Spirulina sobre la respuesta inmune de pollos SPF inducida por la vacuna inactivada comercial contra la enfermedad de Newcastle

The objective of this study was to investigate the effects of Spirulina platensis (SP) powder supplementation on immune response in SPF chickens. For this purpose, 120 SPF chicks were randomly clustered into six groups consisting of 20 birds each which assigned to five groups vaccinated by commercial inactivated Newcastle disease (ND) vaccine at 21 days of age. The four groups were supplemented with 0.5, 1, 1.5 and 2 g of SP per kg of ration at 7 day of age and other group as control treatment group. Control unvaccinated group still without any treatment. Individual blood samples were collected weekly from all groups, and NDV-HI antibodies were measured using Hemagglutination inhibition (HI) test. After 28 days post-vaccination, ten birds from all groups were challenged intramuscularly at a dose 0.5 mL/bird containing 106 EID50 of local NDV genotype VII. Challenge virus shedding was detected using real time qrt-PCR of oropharyngeal swabs that were collected from all challenged chicken groups of at 3, 5, 7 and 10 days post challenge. Obtained results showed that vaccinated groups of SPF-chickens either supplied with Spirulina or control treatment group induced positive serological response as NDV-HI antibody were measured in sera of immunized chicks (7.6, 8, 8.3, 8.9 and 7.4 log2, respectively) at 4 weeks post vaccination (WPV). Significant differences were observed at 2 WPV in the vaccinated SPF chickens consumed 1, 1.5 and 2 g of SP/kg of ration, compared to untreated vaccinated group (p<0.05). Immunized SPF chickens supplied with different SP concentration confer satisfactory protection against heterologous challenge virus (90 percent, 100 percent, 100 percent and 100 percent respectively), in contrast to untreated vaccinated chickens. Different percentages of reduction of viral shedding (55 percent, 65 percent, 76 percent and 87 percent) of treated vaccinated chickens with different concentration of SP were detected, despite untreated group were reduced 46 percent from total viral shedding. These findings suggest that dietary Spirulina has immune-stimulatory effects on the immune system of SPF chickens. One gram from SP per kg of ration was minimum recommended concentration that able to exhibit optimum immune response, increase protection against heterologous strains and able to reduce viral shedding(AU)

El objetivo de este estudio fue investigar los efectos de la suplementación con polvo de Spirulina platensis (SP) sobre la respuesta inmune en pollos SPF. Para este propósito se agruparon al azar 120 polluelos SPF en seis grupos de 20 aves cada uno, que se asignaron a cinco grupos vacunados con la vacuna comercial inactivada contra la enfermedad de Newcastle (ND) a los 21 días de edad. Cuatro grupos se suplementaron con 0,5; 1; 1,5 y 2 g de SP por kg de ración a los 7 días de edad, un grupo vacunado sin suplemento y un grupo sin ningún tratamiento. Semanalmente, se recogieron muestras de sangre individuales de todos los grupos y se midieron los anticuerpos hemaglutinantes contra el virus Newcastle (NDV-HI) mediante la prueba de inhibición de la hemaglutinación (HI). 28 días después de la vacunación, fueron retadas diez aves de cada grupo por vía intramuscular a una dosis 106 EID50 del genotipo VII del NDV local en un volumen de 0,5 mL/ave. Se detectó la eliminación del virus mediante qrt-PCR en hisopos orofaríngeos que se recolectaron en todos los grupos a los 3, 5, 7 y 10 días después del reto. Los resultados obtenidos mostraron que los grupos vacunados de pollos y suplementados con Espirulina y el grupo de control vacunado, indujeron una respuesta serológica positiva cuando se determinaron los anticuerpos NDV-HI en los pollitos inmunizados (7,6; 8; 8,3; 8,9 y 7,4 log2 respectivamente) a las 4 semanas después de la vacunación (SPV). Se observaron diferencias significativas a las 2 SPV en los pollos vacunados que consumieron 1, 1,5 y 2 g de SP/kg de ración, en comparación con el grupo vacunado no tratado (p<0,05). Los pollos inmunizados que recibieron diferentes concentraciones de SP mostraron una protección satisfactoria contra el desafío heterólogo viral (90 por ciento, 100 por ciento y 100 por ciento respectivamente), en contraste con los pollos vacunados no tratados. Se observaron diferentes porcentajes de reducción de la diseminación viral (55 por ciento, 76 por ciento y 87 por ciento) entre los pollos vacunados tratados con diferente concentración de SP. En el grupo no tratado se redujo al 46 por ciento. Estos hallazgos sugieren que la Espirulina en la dieta tiene efectos inmunoestimuladores sobre el sistema inmunitario de los pollos. Un gramo de SP por kg de ración fue la concentración mínima recomendada para una respuesta inmune óptima, y de esta forma aumentar la protección contra las cepas heterólogas y disminuir la diseminación viral(AU)

Ethnomedicinal plants for veterinary use in gypsy communities of the northeast of Brazil / Plantas etnomedicinales para uso veterinario en comunidades gitanas del noreste de Brasil

Gypsies have been in Brazil since the 16th century and today they are more than 800,000 in the country. This article describes the veterinary use of plants by Calon gypsies living in Pernambuco, Northeastern Brazil. The research was carried out with 23 people (> 40 years old), using semi-structured forms and the snowball technique. The cited species were collected during guided tours, identified and deposited at the IPA and UFP herbaria. Ten plants were indicated for veterinary use: Agave sisalana (Asparagaceae), Aspidosperma pyrifolium (Apocynaceae), Apodanthera congestiflora (Cucurbitaceae), Heliotropium indicum (Boraginaceae), Lippia alba (Verbenaceae), Momordica charantia (Cucurbitaceae), Nicotiana tabacum (Solanaceae), Passiflora cincinnata (Passifloraceae), Phaseolus lunatus (Fabaceae), and Solanum paniculatum (Solanaceae). The participants cited various methods of preparation and therapeutic indications for ectoparasitic infections, digestive disorders, and eye and respiratory infections in farm animals. Apodanthera congestiflora and H. indicum stood out for prophylaxis and treatment of Newcastle disease in fowl.

Los gitanos están en Brasil desde el siglo XVI y hoy, son más de 800.000 en el país. Este artículo describe el uso veterinario de plantas por gitanos Calon que viven en Pernambuco, Noreste de Brasil. La encuesta fue realizada con 23 personas (> 40 años), utilizando formularios semi-estructurados y la técnica bola de nieve. Las especies citadas fueron recolectadas en giras guiadas, identificadas y depositadas en los herbarios IPA y UFP. Diez plantas fueron citadas para uso veterinario: Agave sisalana (Asparagaceae), Aspidosperma pyrifolium (Apocynaceae), Apodanthera congestiflora (Cucurbitaceae), Heliotropium indicum (Boraginaceae), Lippia alba (Verbenaceae), Momordica charantia (Cucurbitaceae), Nicotiana tabacum (Solanaceae), Passiflora cincinnata (Passifloraceae), Phaseolus lunatus (Fabaceae) y Solanum paniculatum (Solanaceae). Los participantes citaron varios modos de preparación e indicaciones terapéuticas para infecciones ectoparasitarias, disturbios digestivos, infecciones oculares y respiratorias en animales domésticos. Apodanthera congestiflora y H. indicum se destacaron en la profilaxis y tratamiento de la enfermedad de Newcastle en aves.

Design of recombinant vaccines for Gumboro, Newcastle and Avian Infectious Laryngotracheitis / Diseño de vacunas recombinantes en las enfermedades de Gumboro, Newcastle y Laringotraqueítis Infecciosa Aviar / Desenho de vacinas recombinantes nas doenças de Gumboro, Newcastle e Laringotraqueite infecciosa aviar

The poultry industry worldwide has experienced significant growth in recent years. Likewise, the Colombian poultry sector has become a dynamic and promising industry with high yields and a significant share of the gross domestic product (GDP). However, this development has not been exempt of threats and challenges. Two of the biggest challenges faced by the industry are the prevention and control of infectious diseases and the safety of poultry products. In recent years, major efforts have focused on the control of infectious agents that cause economic losses by implementing prophylactic plans with safe, effective and practical vaccines. These immunizing inocula have changed with genetic engineering developments resulting in the design of recombinant DNA vaccines. This article provides an update on the design of recombinant vaccines and their use for controlling Gumboro, Newcastle and avian infectious laryngotracheitis. It addresses issues such as poultry vaccination principles, description and application of immunogens, and the advantages and disadvantages of this group of vaccines.

La industria avícola ha experimentado un crecimiento significativo en los últimos años a nivel mundial. Igualmente, el sector avícola colombiano se ha consolidado como una industria dinámica y promisoria con altos rendimientos y una importante participación en el producto interno bruto (PIB). Sin embargo, este desarrollo se ha afectado por las amenazas o los retos a los que la avicultura se enfrenta. Dos de los grandes desafíos que esta industria debe enfrentar son la prevención y el control de las enfermedades infecciosas y la inocuidad de los productos avícolas. En los últimos años, los mayores esfuerzos se han centrado en el control de los agentes infecciosos causantes de pérdidas económicas por medio del uso de planes profilácticos con biológicos seguros, eficaces y prácticos. Estos inóculos usados para la inmunización se han modificado con la evolución de la ingeniería genética dando como resultado el diseño de vacunas de ADN recombinante. En este artículo se presenta una actualización sobre el diseño de las vacunas recombinantes y su uso para el control de las enfermedades de Gumboro, Newcastle y laringotraqueítis infecciosa aviar, abordando temas asociados con los principios de la vacunación en avicultura, la descripción y la aplicación de este tipo de inmunógenos, así como las ventajas y las desventajas de dicho grupo de vacunas.

A indústria avícola tem experimentado um crescimento significativo nos últimos anos ao redor do mundo. Igualmente, o setor avícola colombiano tem se consolidado como uma indústria dinâmica e promissória com maiores rendimentos e uma importante participação no produto interno bruto (PIB). Embora, este desenvolvimento tem se visto afetado pelas ameaças ou os desafios que apresenta a avicultura. Dois dos grandes desafios que esta indústria tem que enfrentar são a prevenção e o controle das doenças infecciosas e a inocuidade dos produtos avícolas. Nos últimos anos, os maiores esforços têm se centrado no controle de agentes infecciosos causantes de perdas econômicas por médio do uso de planos profiláticos com biológicos seguros, eficazes e práticos. Esses inoculos usados para a imunização tem sido modificados com a evolução da engenharia genética gerando como resultado o desenho de vacinas de DNA recombinante. Neste artigo, apresenta-se uma atualização sobre o desenho de vacinas recombinantes e sua utilização para o controle das doenças: Gumboro, Newcastle e Laringotraqueite infecciosa aviar, abordando temas associados com os princípios de vacinação em avicultura, a descrição e aplicação deste tipo de imunógenos, assim como as vantagens e desvantagens deste grupo de vacinas.

Anticuerpos séricos contra la enfermedad de Newcastle e Influenza Aviar en aves rapaces de Chile / Serum antibodies against Newcastle disease and Avian Influenza in birds of pley in Chile

Objetivo. Detectar la presencia de anticuerpos séricos sanguíneos contra los virus de la Enfermedad de Newcastle (ENC) e Influenza aviar (IA), para comprender la contribución de las aves silvestres en la transmisión de estos virus en Chile. Materiales y métodos. Se analizaron 63 aves pertenecientes a los órdenes Falconiformes y Strigiformes desde centros de rehabilitación de aves de las zonas central y sur de Chile. Se realizaron las pruebas de inhibición de la hemoaglutinación (IHA) para detectar anticuerpos contra el virus ENC e inmunodifusión en gel agar (IDGA) y ELISA para IA. Resultados. Se detectaron 14 aves positivas (22.2%) para anticuerpos séricos contra el virus de la ENC. En cambio, no se registraron anticuerpos séricos sanguíneos para el virus de la IA. Conclusiones. La presencia de aves rapaces positivas en los centros de rescate a los anticuerpos séricos contra el virus de la ENC puede ser explicada por el consumo de carne de pollos que han sido vacunados contra ENC o consumo de aves que han adquirido directamente el virus vacunal a través de los distintos procedimientos de administración (aerosoles, bebederos) de la vacuna o por el ingreso a los centros de rescate de aves rapaces migratorias, las que podrían facilitar la diseminación de la infección desde los países de origen, hecho que debe ser investigado.

Objective. To detect the presence of blood serum antibodies against Newcastle disease (ND) and Avian influenza (AI) viruses, to understand the contribution of wild birds in transmission of these viruses in Chile. Materials and methods. Sixty-three birds belonging to orders Falconiformes and Strigiformes were analyzed from bird rehabilitation centers in central and south-central Chile. Hemagglutination inhibition (HIA) was used to detect antibodies against the ND virus and further AI virus typing was done by agar gel immune-diffusion (AGID) and ELISA. Results. 14 birds we found (22.2%) with serum antibodies against ND virus; however, there were no blood serum antibodies to AI virus. Conclusions. Birds of prey from rescue centers have been detected positive for serum antibodies against ND virus. Birds of prey could have become positive via direct consumption of chickens vaccinated against ND or from chickens indirectly exposed to the vaccine through different administrative procedures (aerosols, water troughs) or after the admission of migratory birds to rescue centers, which could facilitate the spread of ND from their countries of origin, and should be investigated.

Enfermedad de Newcastle en aves de traspatio del eje cafetero colombiano / Newcastle disease in village chickens in the colombian coffee area

Objetivo. Evaluar la circulación del virus de la enfermedad de Newcastle (ENC) en aves de traspatio de siete municipios del eje cafetero por medio de la técnica ELISA. Materiales y métodos. Fueron encuestados 465 predios para evaluar las normas de bioseguridad de las aves de traspatio de los municipios de Armenia, Circasia, Quimbaya, Montenegro, Filandia, Calarcá y La Tebaida del Departamento del Quindío. Se analizaron 662 muestras de suero para detectar anticuerpos IgG contra el virus de la ENC por ELISA. Resultados. La seroprevalencia de la ENC en la población de aves evaluada fue del 30.7%.(203/662), que corresponde al 38.5% de los predios encuestados. No se encontró asociación entre la especie y la seroreactividad (p=0.21), ni entre la distribución de los anticuerpos por grupos productivos y la edad (p>0.05). Los predios de traspatio son manejados de forma extensiva, albergan en las mismas instalaciones aves de diferentes especies y edades en el 64.3% (299/465), con edades en intervalos entre tres meses y cinco años. Fueron detectadas malas prácticas de manejo de la gallinaza y la mortalidad, sin encontrar asociación estadísticamente significativa entre las variables evaluadas y la presencia de anticuerpos anti-virus de ENC (p>0.05). Conclusiones. Es necesario el establecimiento de planes adecuados de vacunación de las aves de traspatio, la vigilancia epidemiológica activa, la observación de los casos sospechosos, sin dejar de lado la educación y capacitación, sobre el adecuado manejo de los animales, dirigida a los propietarios de las aves como medidas de control de la enfermedad.

Utilización de las tarjetas FTA® para el diagnóstico molecular del virus de la enfermedad de NEWCASTLE en muestras de fluido alantoideo / Utilization of FTA® Cards for the Molecular Diagnostic of Newcastle Disease Virus in Allantoic Fluid Samples

Se evaluó la factibilidad de utilizar las tarjetas FTA® (Flinders Technology Associates) para la inactivación y transporte de fluido alantoideo infectado con el virus de la enfermedad de Newcastle (VEN). La tarjetas FTA® fueron impregnadas con diluciones seriadas de fluido alantoideo con un título inicial de 10(8,8) DL/50 del VEN cepa LaSota y analizadas mediante la prueba de reacción en cadena por la polimerasa transcriptasa reversa (por sus siglas en ingles RT-PCR) a las 24 horas, 7 y 14 días. La concentración más baja del virus detectada en el fluido alantoideo fue 10(5,8) DL/50. La detección del virus a partir de la tarjeta fue posible hasta 14 días después de su inactivación. El re-aislamiento viral en huevos embrionados a partir de las tarjetas resultó negativo. La inactivación del virus en las tarjetas no afectó la calidad de la secuencia de nucleótidos, permitiendo la determinación de su virulencia mediante la secuenciación de los nucleótidos que codifican la zona de corte de la proteína de fusión resultando ser lentogénico en concordancia con la cepa inicial de virus aplicada a las tarjetas. Se concluye que las tarjetas FTA® representan una alternativa válida para el muestreo, inactivación y diagnóstico molecular del VEN, con un alto grado de bioseguridad.

The feasibility of using FTA® cards (Flinders Technology Associates) for inactivation and transportation of allantoic fluid infected with Newcastle disease virus (NDV) was evaluated. Serial dilutions of allantoic fluid with a titer of 10(8.8) ELD/50 of LaSota strain NDV were loaded on the FTA® cards and analyzed after 24 hour, 7 and 14 days using reverse transcriptase-polimerase chain reaction (RT-PCR). The lowest virus concentration that could be detected from the FTA® cards was 10(5.8) ELD/50. The detection of the inactivated virus was possible after 14 days of virus inactivation. No virus re-isolation in embryonating eggs was possible from the cards. No negative effects of the FTA® card inactivation on the nucleotide sequences were observed, allowing the determination of its virulence by direct nucleotide sequencing of the F protein cleavage site, resulting in a lentogénic strain in concordance with the initial virus applied on the cards. It can be conclude that FTA® cards are a valid alternative for NDV sampling, inactivation and molecular diagnostic with a high degree of biosecurity.